Preparation of recombinant PTD-HSP27 and verification of its ability to penetrate the cell membrane of human lens epithelial cells and rabbit cornea

AIM: To construct the prokaryotic expression system containing protein transduction domain (PTD) with heat shock protein 27 (HSP27) in order to prepare and purify the recombinant protein, and to verify whether the recombinant protein PTD-HSP27 has the ability to penetrate the human lens epithelial cell (HLEC) membrane and the rabbit cornea. METHODS: The plasmid pKYB-PTD-HSPB1-6His was constructed by the technique of overlap extension PCR. The plasmid was transformed and PTD-HSP27 was purified through nickel affinity chromatography column and identified by Western blotting. PTD-HSP27-6His was labeled with the fluorescein isothiocyanate (FITC). The penetrating ability of PTD-HSP27 into HLECs and rabbit cornea was tested. RESULTS: The recombinant PTD-HSP27 plasmid was successfully cloned and effectively expressed. The correctness of the recombinant protein PTD-HSP27 was demonstrated. Fluorescence microscopic examination showed that PTD-HSP27-FITC was internalized by HLECs. Fluorescent labeled PTD-HSP27 was then observed in the rabbit aqueous humor. CONCLUSION: The recombined gene PTD-HSPB1 was constructed by overlap extension PCR technique and the PTD-HSP27 fusion protein was prepared and purified by nickel affinity chromatography column. Using the technique of PTD-fusion protein, HSP27 was transduced into HLECs and passed through the cornea.     

华灰莉木提取物对柑橘全爪螨的杀螨活性

以华灰莉木为试材,采用溶剂冷浸法提取植物成分,溶剂液-液萃取法对植物成分进行初步分离,Potter喷雾法测定杀螨活性,研究华灰莉木提取物和初步分离物对柑橘全爪螨的影响。结果表明:华灰莉木叶和枝条甲醇提取物对柑橘全爪螨雌成螨有较高的触杀毒力,致死中浓度(LC50)分别为5.5334g/L和3.9682g/L。叶的杀螨活性物质主要集中在水萃取物中,属于极性强的物质;枝条的杀螨活性物质主要集中在石油醚萃取物中,属于极性弱的物质。叶提取物的水萃取物和枝条提取物的石油醚萃取物对柑橘全爪螨雌成螨的LC50分别为3.2970g/L和1.7372g/L。     

果胶酶酶解红枣制汁工艺的研究

以红枣为原料,采用果胶酶酶解浸提的方法制备红枣汁。以红枣汁可溶性固形物含量为参考指标,通过单因素试验和正交试验,研究了果胶酶添加量、酶解时间、酶解温度和p H值对枣汁浸提效果的影响。结果表明,最佳酶解工艺如下:果胶酶添加量为0.3%,酶解时间为4h,酶解温度为55℃,最适p H值为3.5,此工艺条件下所获得的红枣汁可溶性固形物含量为15.87%,所得红枣汁枣香浓郁,无苦味,颜色红亮,稳定性好。     

常山胡柚叶片DNA的抽提与分析

经反复实验，采用在抽提前加入一定量的抗氧化剂β－巯基乙醇，用冰冻的异丙醇来沉淀DNA，并增加氯仿／异戊醇抽提次数的所谓改良CTAB法，对常山胡柚叶片DNA抽提与分析，不仅成功提取到常山胡柚叶片DNA，而且所得的DNA浓度高、纯度好，20个试样的DNA苹均质量浓度为272.86μg/mL，平均每克鲜叶片可获DNA约82μg，纯度基本上都在1.4-1.8范围内，并经RAPD反应验证，完全能满足常规分子生物学分析的要求。     

利用人工授精技术改良半散放马鹿的研究

采用人工授精方法改良半散放马鹿 ,经过改良的马鹿 ,1日龄内主要体尺体重指标优于同期自然繁殖马鹿 ,其中体重增加 17.34% ,体斜长增长 12 .2 6 % ,肩高增加 11.2 7% ,且有较强的抗病能力。公鹿产茸量增加明显 ,初角茸增加 4 4.4 4% ,头锯茸增加 5 2 .0 7% ,2锯茸 6 1.39% ,按鹿茸的生长规律 ,到 5锯时鹿茸产量可提高 1倍     

单杆芦荟离体快速繁殖技术研究

单杆芦荟离体快速繁殖，芽增殖培养基以MS＋BA2．5mg/L NAA0.2-0.3mg/L，生根培养基以1／2MS＋NAA 2.0mg/L 活性炭0．2％－0．3％，壮苗培养基以1／2MS＋IBA2.0mg/L为好。培养温度以28℃最佳。快速繁殖方法用分叶法比常用的分株、分芽方法，繁殖系数高。培养出的壮苗移栽于河沙中，成活率一般在80％以上。     

华南地区短枝木麻黄种源试验

对华南地区短枝木麻黄种源 16个性状的两试点联合方差分析表明 :除 PBA和 PBL 外 ,其它性状在地点间有极显著差异 ,表明参试种源在两个地点分别进行种源筛选 ;除 1年生树高、2～ 3年生单株材积外 ,其它数量性状在种源间有显著或极显著差异 ;4年生的树高、胸径、单株材积、PBD、PBT、PBL在种源×地点 ( P× S)互作间有显著或极显著差异。方差分量比例计算结算表明 ,2～ 4年生时 ,除 4年生单株材积方差分量比例略有降低外 ,树高、胸径和单株材积的地点方差分量比例及 P× S互作的方差分量比例均随年龄的增加而增加 ;质量性状 SFA、SFS、PBD和 PBT,地点方差分量比例最大 ,而种源或加上 P× S互作的方差分量 <10 %。当不考虑 P× S互作效应时 ,种源数量性状和质量性状的遗传变异系数和广义遗传力均比考虑互作效应时相应性状的遗传变异系数和广义遗传力大。4年生树高、胸径、保存率、SFA和 SF S等 6个性状 ,按地点对参试种源进行评定结果为 :试验 E94 6中 ,优良种源为 180 86、18118、183 55、180 13、182 4 4、18119、182 88、183 4 8、180 15和 180 0 8;试验 E94 4中优良种源有 18154、183 55、1812 8、18143、18153、1812 7、1813 4、142 3 3和 182 88。这些种源均好于国内对照种源 ,分别占各自参试种源的     

西双版纳高海拔山地小气候和橡胶宜林地

通过对多年来西双版纳高海拔山地逆温和橡胶树试种研究资料分析，论述了以坡向为主导因素的西双版纳高海拔山地小气候和精选橡胶树宜林地的问题，为制止盲目扩种橡胶树提供依据。     

浅析生态园林建设与城市可持续发展

如何利用园林植物的生态效应为城市可持续发展服务是每一个城市规划工作者共同面临的问题。文章分析了生态园林建设与城市可持续发展的关系,发展现状与前景,并对其未来可能的发展方向与思路提出了见解。     

氧乐果和吡虫啉对小麦过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶及过氧化氢酶活性的影响

为明确常用杀虫剂对小麦抗氧化性的影响,研究了小麦幼苗期用不同浓度氧乐果和吡虫啉的营养液处理后144 h内对其过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽还原酶(GR)及过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果表明:用400、800和1 600 mg/L的氧乐果处理小麦幼苗后24 h,POD活性均显著降低;1 600 mg/L的氧乐果处理后6 h,其CAT活性比对照降低了32.9%;各浓度氧乐果处理后144 h,GR活性均显著降低。而用25、50和100 mg/L的吡虫啉处理小麦幼苗后144 h内,只有50 mg/L处理组在12 h时的POD活性比对照升高了65.0%。杀虫剂对小麦幼苗中3种抗氧化酶活性的影响不仅与药剂种类有关,还具有一定的剂量效应与时间效应。